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高壓細胞破碎儀如何進行細胞破碎

更新時間:2017-01-16      點擊次數(shù):2157
     高壓細胞破碎儀采用電機驅(qū)動,而非氣動方式,也不使用壓縮空氣調(diào)節(jié)均質(zhì)閥,這避免了空氣經(jīng)壓縮產(chǎn)生的水份進入高壓泵或均質(zhì)閥腔體,污染細胞破碎的樣品,而導(dǎo)致高壓細胞破碎儀無法正常運行。高壓細胞破碎儀對酵母細胞、大腸桿菌破碎,一次破碎,細胞破碎率可以達到90%以上,2次或2次以上破碎,細胞破碎率可以達到大約100%,且細胞破碎后釋放的蛋白活性好。
    高壓細胞破碎儀就是將電能通過換能器轉(zhuǎn)換為聲能,這種能量通過液體介質(zhì)而變成一個個密集的小氣泡,這些小氣泡迅速炸裂,產(chǎn)生的象小一樣的能量,從而起到破碎細胞等物質(zhì)的作用的儀器。聲波細胞破碎儀工作原理基于超聲波在液體中的空化作用,換能器將電能量通過變幅桿在工具頭頂部液體中產(chǎn)生高強度剪切力,形成高頻的交變水壓強,使空腔膨脹、爆炸將細胞擊碎。另一方面由于超聲波在液體中傳播時產(chǎn)生劇烈地擾動作用,使顆粒產(chǎn)生很大的加速度,從而互相碰撞或與器壁互相碰撞而擊碎。
    高壓細胞破碎儀如何進行細胞破碎:
    1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至zui慢處,開動開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
    2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
    3、超聲波處理法:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鐘,此法的缺點是在處理過程會產(chǎn)生大量的熱,應(yīng)采取相應(yīng)降溫措施。對超聲波敏感和核酸應(yīng)慎用。
    4、反復(fù)凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細胞內(nèi)冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結(jié)構(gòu)破碎。
    5、化學處理法:有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
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